艾滋病检测样品的采集处理和送检指南
作者: 艾检测网
更新时间: 2020年09月27日 17:34:56
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简述:
1. 目的 规范用于人免疫缺陷病毒( HIV )检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血斑( DBS )样品的采集和处理方法以及送检要求。 2. 适用范围 适用于 HIV 抗体检测
1. 目的
规范用于人免疫缺陷病毒(HIV)检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血斑(DBS)样品的采集和处理方法以及送检要求。
2. 适用范围
适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养样品。
3. 样品种类及相应的用途
3.1 全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。
3.2 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。
3.3 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。
3.4 全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞(PBMC)及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。
3.5 PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。
4. HIV检测样品的采集处理和送检程序
4.1 采样前准备
根据检测项目的具体要求,确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法,按照临床采血技术规范的要求操作,遵守生物安全要求(参见2009版规范第八章实验室生物安全)。
要检查所需物品是否已备齐,是否在有效期内,有无破损,是否足量,特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致,并注明样品采集时间。选择合适的室内(外)采血空间,受检者坐(卧)于合适的位置,准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。
4.1.1 样品的编码和记录
4.1.2 应制定样品编码的标准操作程序(SOP),规定样品编码的原则和方法,为样品制定唯一性编码(编号),保证其唯一性。
4.1.3 采血前,先对装有样品的离心管或滤纸进行标记,核对后编码。要将标签贴在试管的侧面,最好使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。
4.1.4 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品,同时录入电脑保存。送检标本需填写样品检测申请单,表格内资料要填写齐全,送检时与标本分开放置。
4.2 采集和处理样品
4.2.1 血液
4.2.1.1 抗凝全血:消毒局部皮肤,用加有抗凝剂(EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠)的真空采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管中,轻轻颠倒混匀6~8次,备用。
4.2.1.2 末梢全血:消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或食指。1岁以下儿童采用足跟部)。用采血针刺破皮肤,用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液,备用。
4.2.1.3 血浆:将采集的抗凝全血1500~3000r/min离心15min,上层即为血浆,吸出置于合适的容器中,备用。
4.2.1.4 血清:根据需要,用一次性注射器(或真空采血管)抽取5~10ml静脉血,室温下自然放置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用1500~3000r/min离心15min,吸出血清,置于合适的容器中,备用。
4.2.1.5 淋巴细胞富集液:将采集的抗凝全血1500~3000r/min离心15min ,吸取血浆层下的淋巴细胞富集液,置于合适的容器中,备用。
4.2.1.6 PBMC:使用淋巴细胞分离液,进行密度梯度离心,吸出PBMC层,备用。